cordial saludo compañeros mi nombre es Wilmar Hernandez.

Envió aporte del trabajo los cuales los realizamos con los compañeros del grupo 3

PRACTICA No 2

Cuantificación de azucares

Ø  Objetivos

Evaluar

Temática de la práctica: Metabolismo microbiano.

Fundamento teórico:

Los microorganismos consumen diferentes tipos de sustratos, pero poseen preferencia por un tipo particular de sustrato y algunos resultan no consumibles para algunas cepas de una especie en particular. Cuando dos o más sustratos están presentes en el medio de cultivo, los microorganismos no los consumen por igual, sino que consumen  preferencialmente uno de ellos hasta agotarlo. Solo en este punto inician el consumo del siguiente sustrato preferido. Este fenómeno se conoce como diauxia. Esa preferencia por un sustrato en particular es diferente para cada una de las cepas de un organismo, y puede ser medida como la variación en la velocidad de  crecimiento, consumo de sustrato o generación de producto.  

Descripción de la práctica:

 Para que un microorganismo produzca el metabolito deseado es necesario proporcionarle un sustrato que garantice un mayor rendimiento. Para ello, es necesario realizar diferentes ensayos que nos permita saber las diferencias en preferencia de diferentes tipos de sustrato. En este ejercicio de laboratorio analizaras estadísticamente las diferencias existentes en el consumo de diferentes tipos de azúcar por diferentes cepas comerciales de levaduras.

Recursos a utilizar en la práctica: 

Ø  8 x 2 g de levadura seca o húmeda de cerveza o de panadería. Preferiblemente 3 grupos de laboratorio deben trabajar con el mismo tipo de levadura.

Ø  200 cm3 de solución de fructosa 0.2M.

Ø  200 cm3 de solución de galactosa 0.2M.

Ø  200 cm3 de solución de glucosa 0.2M.

Ø  200 cm3 de solución de lactosa 0.2M.

Ø  200 cm3 de solución de maltosa 0.2M.

Ø  200 cm3 de solución de rafinosa 0.2M.

Ø  200 cm3 de solución de sucrosa 0.2M.

Ø  8 x 0.5g de ortofosfato dihidrogeno de amonio.

Ø  8 x 0.5g de sulfato de amonio.

(Alternativamente puede emplearse 1g de nutriente de levadura disponible, comercialmente, para reemplazar las dos sales de amonio)

Ø  8 x 250 cm3 Erlenmeyer.

Ø  8 x tapones de caucho con dos orificios.

Ø  Varillas de vidrios.

Ø  Bureta de 50 cm3.

Ø  Jeringas aforadas de 25 cm3 o equivalentes para muestreo.

Ø  8 x 100 cm3 Erlenmeyer para titulación.

Ø  Solución de hidróxido de sodio 0.1M (alrededor de 400cm³ )

Ø  Solución indicadora de fenolftaleína y gotero.

Procedimiento:

Desarrollo:
Sacarosa  600 nm

 

Se observan una fase de adaptación inicial que va de 0 a 60 minutos.

Se observa dos periodos de crecimiento exponencial: el primero de 60 a 90 minutos y el segundo de 150 a 180 minutos.

No observa una fase estacionaria.

La fase de muerte celular se observa en el periodo de 90 a 150 minutos y después de los 180 minutos.

 

En la fase de crecimiento exponencial se tiene la siguiente expresión