Cuantificaciòn de azucares

INTRODUCCION

En esta práctica se permitió la identificación de azucares sus diferencias por cepas  de levadura observando estadísticamente la producción del metabolito deseado proporcionándole un sustrato que garantice su rendimiento. Esto se hará con azucares como la fructosa, la maltosa, lactosa y la glucosa en tres horas de laboratorio calculando la absorbancia encada0,5 horas de la práctica así de esta manera gráficamente distinguiremos las diferencias entre estos azucares.

  

JUSTIFICACION

La importancia del conocer el metabolismo de los microorganismos promisorios ó de interés industrial tiene un interés no solo biológico sino también científico.

Esto se debe ya que el metabolismo consiste de un gran número de reacciones químicas destinadas a transformar las moléculas nutritivas en elementos que posteriormente serán utilizados para la síntesis de los componentes estructurales; como pueden ser las proteínas. Otra parte importante del metabolismo es la de transformar y conservar la energía que está contenida en una reacción química en algún proceso que requiera de energía, como puede ser el trabajo o el movimiento.

Nos interesa la transformación de moléculas nutritivas, la conservación de energía y para esto hay que estudiar y conocer el metabolismo de diferentes microorganismos.

  

REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

Los seres vivos compartimos los mismos tipos de átomos y moléculas básicos que nos dan diversidad de estructuras y funcionamiento. Formados todos por combinaciones de ciertos elementos comunes: carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, fósforo y azufre; precisamente los mismos que conforman aminoácidos y ácidos nucleicos. Estos fundamentos físico químicos son las que evidencian la delgada línea divisoria entre organismos sencillos y aquellos que consideramos complejos, el punto de partida y la columna vertebral conceptual de la biotecnología. En el nivel molecular, todo organismo vivo funciona esencialmente de la misma manera, sea que se trate de un ser humano, un pez, una planta o una bacteria.

Los ácidos nucleicos son llamados muy acertadamente “moléculas de la vida”, principalmente el ADN, aunque los bioquímicos evolucionistas están casi todos de acuerdo en que en la biosfera primitiva de hace 3500 a 3000 millones de años, fue precedida por un mundo donde el “protagonista” fue realmente el ARN. Tomándose en cuenta que, según estimaciones más recientes, la Tierra se formó como tal, hace unos 4500 millones de años.

Por su parte, las proteínas representan una clase muy importante de moléculas, porque son un constituyente fundamental de la materia viva y desempeñan una gama amplia de funciones en los organismos vivos. Algunas son estructurales, como las que forman las membranas celulares; otras, son reguladoras de procesos biológicos, como las hormonas de naturaleza proteica; algunas son catalíticas, como las enzimas que intervienen y facilitan las reacciones bioquímicas fundamentales; existen aquellas que actúan como transportadoras de otros compuestos y elementos esenciales, como la hemoglobina; otras son “defensivas” como los casos de las inmunoglobulinas. En fin, se puede afirmar que las proteínas son los pedestales funcionales y estructurales, convirtiéndose en los responsables de casi todas las propiedades distintivas de los seres vivos.  En Colombia, el arroz es el sustrato más utilizado para la producción de biopreparados de Trichoderma sp. A partir de procesos de fermentación artesanal e industrial. En la actualidad la empresa Sanatrade S.A. elabora un producto llamado Tricho-D el cual tiene como ingrediente activo al hongo Trichoderma harzianum, conocido como un bio-regulador y antagonista natural de los fitopatógenos, este producto es utilizado en Colombia en investigaciones para la protección de zocas del café frente al ataque de Cerotocystis fimbrata. (Castro y Rivillas, 2003).

La utilización de otro tipo de sustratos naturales para la producción de esporas de Trichoderma sp. ha sido poco estudiada en el país sólo empresas como Natural Control ubicada en la Ceja, Antioquia y Laverlam S.A., en Cali, producen toneladas de estos biopreparados utilizando arroz como sustrato base para el desarrollo y esporulación del hongo, trabajos realizados por Fernández y Vega (2001), probaron la eficiencia y viabilidad de la producción de esporas de Trichoderma sp. con subproductos de la industria azucarera de Cuba, con soportes sólidos como materiales celulósicos, atendiendo a la alta capacidad celulítica de este hongo.

La utilización de subproductos agrícolas con altos contenidos celulósicos plantea la posibilidad de reemplazar los sustratos utilizados como el arroz y el trigo, los cuales actualmente encuentran limitado su utilización por los altos costos. Así mismo, existen semillas de árboles con alto contenido de nutrientes que pueden ser utilizadas para enriquecer los sustratos, como es el caso de las semillas del árbol del pan (Artocarpus incisa), es una especie perteneciente al género de los Artocarpus, dentro de la tribu de las Artocarpeae, de la familia de las Moraceae con cientos de variedades de árboles distribuidas en zonas tropicales de Asia y Suramérica. Las semillas de los frutos del pan producidas abundantemente por el árbol son muy nutritivas. Son ricas en azucares contienen entre un 20 y 37% de carbohidratos, calcio, hierro, fósforo y niacina, y en vitaminas C y B1.

  

METODOLOGÍA

Obtener caldo estéril de 5.000.000ug/l

Del caldo estéril obtener solución estándar de 150ug/l

Obtener soluciones de

100ug/l

50ug/l

25ug/l

Tomar datos de absorbancia cada 0,5 horas por 3 horas

Graficar y registrar

 

  

RESULTADOS

Tabla N°1 Resultado De Absorbancia Vs Tiempo

Azúcar Tiempo	0				0,5				1			1,5					2				2,5			3
	100	50	25	100		50	25	100		50	25		100	50	25	100		50	25	100		50	25		100	50	25
Fructosa	0,01	0,03	0,09	0,003		0,001	0,001	0		0,002	0,001		0,001	0,003	0,002	0,001		0,002	0,005	0,005		0,004	0,001		0,001	0	0
Lactosa	0,003	0,004	0,002	0		0,001	0,004	0,004		0,003	0,002		0,005	0	0	0,002		0,007	0,001	0,003		0,009	0,001		0,002	0,009	0,001
Maltosa	0,001	0	0,002	0,003		0,002	0,001	0,008		0,003	0,001		0,007	0,003	0,005	0,006		0	0,004	0,002		0	0,002		0	0	0,002
Glucosa	0	0,002	0,03	0,001		0	0,001	0		0,004	0001		0,001	0	0,006	0,005		0,004	0,001	0,001		0,004	0,01		0,001	0,004	0,001

AZUCAR	1 LEC	2 LEC
FRUCTOSA	0	8,4
LACTOSA	0,2	3,2
MALTOSA	0,3	1
GLUCOSA	0	0

 Tabla N°2 Grados Brix

Graficas

Grafica N°1 Fructosa

Grafica N°2 lactosa

Grafica N°3 Maltosa

Grafica N°4 glucosa

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Tanto la fructosa como la glucosa tuvieron comportamientos similares en todos los tiempos sin embargo la maltosa es el azúcar que más cumple con el metabolismo ya que como se ve en la gráfica cumple con las fases de crecimiento. De esto se observa  que la fructosa y glucosa tienen un metabolismo mejor en esta clase de cultivos, es decir cumple con lo solicitado.

 Con los datos obtenidos en el espectrofotómetro, se puede deducir que la absorbancia aumenta con la concentración de las soluciones y la distancia que recorre el rayo de luz, debido a que hay mayor cantidad de analito ( mayor cantidad de moléculas que adsorben energía para excitarse). Las cuales toman esta energía del rayo de luz, disminuyendo la intensidad de la radiación, por lo que la transmitancia disminuye al aumentar la concentración.

CONCLUSIONES

En el estudio realizado se evidencia que el tiempo es un factor determinante durante la cuantificación de azucares, ya que durante las pruebas se obtuvo una eliminación comparación con cada uno de ellos y en diferentes tiempos cada absorbancia es diferente; es decir  A mayor concentración en las soluciones, mayor será la cantidad de soluto adsorbida cuando se mantiene la cantidad de adsorbente constante.

BIBLIOGRAFIA

1.    Chaplin MF (1986) Monosaccharides. En Chaplin MF, Kennedy JF (eds.):  “Carbohydrate Analysis: A Practical Approach”. IRL Press (Oxford, England) pp. 1-36. Descripción muy simple pero bastante completa de los principales métodos de análisis de monosacáridos

2.    A.O.A.C. Official Methods of Analysis. 1980.  Horwitz W. (ed). Ed. 13^th. Washington, U.S.A.  

3.    Ting, S.V. 1956.  Rapid Colorimetric Methods for Simultaneous Determination of Total Reducing Sugars and Fructose in Citrus Juices. Agric. Food Chem. Vol. 4(3) 263-266.